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  • 新冠核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要求,先了解這6點(diǎn)

    2020-05-13 10:15 來(lái)源:廣東康合  

            RT-PCR是檢測(cè)新型冠狀病毒核酸最廣泛、最準(zhǔn)確的篩選和確認(rèn)方法。大規(guī)模的核酸檢測(cè)將不可避免地引起相關(guān)機(jī)構(gòu)和單位重視建立標(biāo)準(zhǔn)化的臨床PCR實(shí)驗(yàn)室。相關(guān)建設(shè)問(wèn)題可咨詢020-29038089。
     .
           一、新冠核酸檢測(cè)PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)依據(jù)
            新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南(第二版)
           GB19489-2008《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》
           GB50346-2011《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》
           WS233-2017《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》
           《臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法》衛(wèi)生部
           《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)【2010】194號(hào)
           《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作導(dǎo)則》
     
           二、初步了解PCR實(shí)驗(yàn)室
           如何避免污染是臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的關(guān)鍵問(wèn)題。因此,實(shí)驗(yàn)室的布局、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、風(fēng)量控制等都是圍繞這一核心問(wèn)題展開的。
            (1)現(xiàn)場(chǎng)要求高。需要標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分離和氣流控制:試劑制備、樣品制備、PCR擴(kuò)增檢測(cè)和擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)。每個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)都有一個(gè)緩沖區(qū)。同時(shí),每個(gè)區(qū)域均采用氣壓調(diào)節(jié),使試劑和樣品在整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不受氣溶膠污染,減少擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人和環(huán)境的污染。機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗確保試劑和樣品在轉(zhuǎn)移過(guò)程中不受污染(人員分流)。
           (2)人員要求高。進(jìn)入PCR實(shí)驗(yàn)室,需要接受基礎(chǔ)理論、實(shí)驗(yàn)原理、標(biāo)準(zhǔn)操作、質(zhì)量保證、注意事項(xiàng)等方面的標(biāo)準(zhǔn)培訓(xùn),并取得PCR工作證。
           (3)高檢測(cè)風(fēng)險(xiǎn)。在檢測(cè)過(guò)程中,由于樣品蓋的打開、核酸提取的振動(dòng)和離心作用,可能產(chǎn)生氣溶膠,存在感染的風(fēng)險(xiǎn)。
           (4)防護(hù)要求高。個(gè)人防護(hù)必須按照生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室的個(gè)人防護(hù)要求進(jìn)行。

    核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室平面圖
     
           三、新冠核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)參數(shù)(供參考)
     

    區(qū)域 潔凈度等級(jí) 最小換氣次數(shù)(次/小時(shí)) 與室外方向上相鄰相通房間最小壓差(Pa) 溫度(℃) 相對(duì)濕度(%) 風(fēng)速(m/s) 噪聲dB(A)
    試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū) 8 12 +10 18~26 40-60 ≤0.15 <60
    樣本制備區(qū) 8 15 -10 18~26 40-60 ≤0.15 <60
    核酸擴(kuò)增區(qū) 8 15 -15 18~26 40-60 ≤0.15 <60
    產(chǎn)物分析區(qū) 8 15 -20 18~26 40-60 ≤0.15 <60
    緩沖間 - 6 0 18~26 40-60 —— <60
    PCR專用走廊 - 6 5 18~26 40-60 —— <60
    一般情況下,PCR實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求,因此有必要根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容來(lái)確定實(shí)驗(yàn)室的潔凈度。當(dāng)PCR實(shí)驗(yàn)樣品需要保護(hù)時(shí),實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)潔凈空調(diào)系統(tǒng)。對(duì)于新冠核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室,建議設(shè)置10萬(wàn)級(jí)凈化。
     
           四、 新冠核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)
           (1)平面布局:不論是組合式還是分散式布置的PCR實(shí)驗(yàn)室,各功能房間均宜設(shè)置獨(dú)立緩沖間
           (2)區(qū)域空氣流向:為避免交叉污染,PCR實(shí)驗(yàn)室空氣流向必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行,即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
           (3)通風(fēng)空調(diào):為避免交叉污染,各功能用房?jī)?nèi)空氣不能摻混。混合式PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用新風(fēng)直流空調(diào)系統(tǒng),當(dāng)采用新風(fēng)系統(tǒng)有困難時(shí),各區(qū)域的空氣只能在自己的房間內(nèi)循環(huán)。
           (4)生物安全:按照新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南(第二版)的規(guī)定,2019-nCoV病原體暫按照第二類病原微生物進(jìn)行管理,則樣本植被區(qū)宜為負(fù)壓或加強(qiáng)型P2實(shí)驗(yàn)室,核酸操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。
           關(guān)鍵技術(shù)措施包括:
           *絕對(duì)負(fù)壓(避免室內(nèi)潛在污染外泄)
           *氣流組織(室內(nèi)定向流,從低污染風(fēng)險(xiǎn)區(qū)流向高污染風(fēng)險(xiǎn)區(qū))
           *排風(fēng)無(wú)害化處理(高效過(guò)濾、高空排放)

           五、新冠核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室氣流組織建議
           (1)氣流組織宜采用上送下排,送風(fēng)口和排風(fēng)口布置應(yīng)使室內(nèi)氣流停滯的空間降低到最小程度。
           (2)在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點(diǎn)的上方附件不得設(shè)送風(fēng)口
           (3)高效過(guò)濾器排風(fēng)口應(yīng)設(shè)在室內(nèi)被污染風(fēng)險(xiǎn)最高的區(qū)域,單向布置,不得有障礙;
           (4)不能以回(排)風(fēng)夾墻代替排風(fēng)直管,排風(fēng)高效過(guò)濾裝置與排風(fēng)總管的連接必須全部是實(shí)體風(fēng)管。
    實(shí)驗(yàn)室氣流

           六、新冠核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室裝飾裝修
           核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室有設(shè)計(jì)理念、裝修要求、凈化空調(diào)系統(tǒng)、通風(fēng)、自控、工藝設(shè)備等幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。
    核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室裝修
           材質(zhì):隔墻及吊頂——凈化彩鋼板、地面——同質(zhì)透芯PVC地板、凈化實(shí)驗(yàn)室專用門、觀察窗;
           要求:
           1.墻面:光潔、不產(chǎn)塵積塵、耐腐蝕,易清潔消毒、無(wú)縫隙;
           2.地面:防靜電、耐腐蝕、無(wú)縫隙、無(wú)滲漏;
           3.陰陽(yáng)角:均用圓弧角密封處理;
           4.門:必須設(shè)置自動(dòng)互鎖(機(jī)械或電子);
    核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室走廊
           凈化空調(diào)、通風(fēng)系統(tǒng)、自控系統(tǒng)
            1.避免交叉污染,采用全新風(fēng)空調(diào)系統(tǒng);
            2.樣品制備區(qū)嚴(yán)格按照BSL-2設(shè)計(jì)施工;
            3.排風(fēng)系統(tǒng)全部按照要求采用高效過(guò)濾器凈化;
           4.氣流組織:采用上送下排形式;
           5.壓力梯度控制通過(guò)微壓差計(jì)及精密自控系統(tǒng)控制;
           6.實(shí)驗(yàn)室入口處顯示房間內(nèi)各項(xiàng)指標(biāo)參數(shù),并設(shè)置偏離報(bào)警;
           工藝設(shè)備
           1.實(shí)驗(yàn)臺(tái)下部均留空,無(wú)死角;
           2.全部采用不銹鋼304制作;
           3.樣品制備區(qū)生物安全柜:BSC-||-B2型;
           4.樣品制備區(qū)設(shè)置洗眼裝置,必要時(shí)應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置;
           5.非接觸式操作理念(感應(yīng)式水龍頭、感應(yīng)式自動(dòng)門、互鎖傳遞窗等);
    核酸檢測(cè)人員
     
           實(shí)驗(yàn)室建設(shè)涉及到材料選擇、穩(wěn)定性、精度控制等多個(gè)技術(shù)和知識(shí)領(lǐng)域。不同的實(shí)驗(yàn)室由于試驗(yàn)樣品和試驗(yàn)方法的不同,對(duì)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)有不同的要求。可以說(shuō)有很多不同之處。一個(gè)完善的實(shí)驗(yàn)室在分析檢測(cè)中起著重要的作用,對(duì)保證實(shí)驗(yàn)室工作人員的健康也起著重要的作用。


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